25-OH-Vitamin D ELISA

Verwendungszweck

Enzymimmunoassay zur quantitativen Messung des gesamt 25-OH-Vitamin D (25-OH-Vitamin D2 und 25-OH-Vitamin D3) in Humanserum als physiologischer Marker zur Unterstützung der Diagnose von Vitamin-D-Suffizienz. Die Patientenpopulation umfasst Personen, bei denen das Risiko besteht, dass sie von einem ausreichenden Vitamin-D-Spiegel abweichen. Der 25-OH-Vitamin D ELISA ist ein Festphasen-Enzymimmunoassay (ELISA), der auf dem Prinzip der kompetitiven Bindung basiert und auf einem Absorptionslesegerät gemessen wird. Der Assay ist halbautomatisch und erfordert allgemeine Laborgeräte und Verbrauchsmaterialien wie Absorptions-Mikroplatten-Reader/Washer, Vortexer und Pipetten zur Durchführung des Tests. Der Assay kann vom Laborpersonal zur Automatisierung auf offenen ELISA-basierten Liquid-Handler-Plattformen angepasst werden; die Programmierung der Schritte und das Timing, die in den Testanweisungen des manuellen Kits vorgeschrieben sind, müssen jedoch vom Labor strikt eingehalten und überprüft werden. Die Testergebnisse werden anhand einer Standardkurve berechnet und mit einem definierten Cut-off verglichen. Das Testkit ist für den professionellen Laborgebrauch durch geschultes Personal vorgesehen. Das Testkit ist nicht für den Hausgebrauch oder den Gebrauch durch Laien bestimmt.

Die präzise Bestimmung des Vitamin-D-Statuses einer Person hängt von der Bestimmung des Gesamt-25-OH-Vitamin D (25-OH-Vitamin D2 + 25-OH-Vitamin D3) ab. Daher wurde unser Assay so entwickelt, dass er sowohl die D2 als auch die D3 Isoform detektiert. Im menschlichen Körper ausbalancierte Vitamin-Spiegel sind wichtig, um Krankheiten (z.B. kardiovaskuläre Erkrankungen, Typ-2-Diabetes) vorzubeugen^[3]. Als ein essentiellel Vitamin ist das Vitamin D wichtig für die Beibehaltung des Kalziumstoffwechsels und somit der Knochengesundheit^[2]. Weiterhin wird die Rolle des Vitamin D bei Störungen und Erkrankungen, die nicht das Skelett betreffen, mit Interesse betrachtet^[4,5]. Es wurde beobachtet, dass eine große Anzahl von Patienten in der klinischen Praxis Vitamin-D-defizient sind^[1]. Die Identifizierung von Patienten mit insuffizienten Vitamin-D-Spiegeln in Vitamin-D-Mangel-gefährdeten Patientengruppen, kann helfen die Gesundheit zu erhalten und Krankheiten vorzubeugen^[2].

Korrelation zur LC-MS/MS

Der Tecan-IBL 25-OH-Vitamin D ELISA korreliert mit der IDHPLC-MS/MS Referenzmethode (Die Methode wird vom Joint Committee for Traceability in Laboratory Medicine (JCTLM) als Referenzmessprozedur (RMPs) höherer Ordnung anerkannt).

Die Korrelation wurde mit 40 Serumproben (CDC Phase-I-Proben, Einzelspenderseren) durchgeführt, in dem die Ergebnisse des Tecan-IBL 25-OH-Vitamin D ELISA mit den vorgegebenen Referenzkonzentration der CDC ermittelt per IDHPLC-MS/MS verglichen wurden. Die Regressionsanalyse zeigt eine Geradensteigung von 0,9787 und einen Achsenabschnitt von -2,961 nmol/mL mit einem Korrelationskoeffizienten r = 0,94.

Automation

Der IBL-International 25-OH-Vitamin D ELISA wurde so entwickelt, dass er leicht auf offene ELISA Automaten adaptiert werden kann. Es wurde in-house eine Korrelation der manuellen Abarbeitung mit der automatisierten Abarbeitung auf dem TECAN Freedom EVOlyzer® durchgeführt.

Vorteile unseres ELISA

• Exzellenete Korrelation zur IDHPLC-MS/MS Referenzmethode RE53041 = 0,9787 x LCMS – 2,961, R = 0,94
• Direkter Assay ohne Extraktion
• gebrauchsfertige Reagenzien
• Leicht adaptierbar auf offenen ELISA Automaten

Produktverfügbarkeit und regulatorischer Status können außerhalb der EU je nach länderspezifischer Registrierung variieren. Wenden Sie sich für weitere Informationen an Ihren Tecan-Partner.

Für konkrete Daten konsultieren Sie bitte die Arbeitsanweisung in der Download Box oben auf der rechten Seite.