CIC-C1q ELISA

ZWECKBESTIMMUNG

Immunoenzymatisches kolorimetrisches Verfahren zur quantitativen Bestimmung der Konzentration des zirkulierenden Immunkomplexes C1q in humanem Serum oder Plasma. Der CIC-C1q ELISA Kit ist nur für den Laborgebrauch bestimmt.

ZUSAMMANFASSUNG UND ERKLÄRUNG

Der Immunkomplexes ist eine biochemische Kaskade des Immunsystems, die hilft Krankheitserreger aus einem Organismus zu entfernen. Er stammt von vielen kleinen Plasmaproteinen, die zusammenwirken, um das primäre Endergebnis der Zytolyse zu bilden, indem sie die Plasmamembran der Zielzelle zerstören. Die Aktivierung dieses Systems führt zu Zytolyse, Chemotaxis, Opsonierung, Immunreinigung und Entzündung sowie zur Markierung von Krankheitserregern für die Phagozytose. Das Komplementsystem besteht aus mehr als 35 löslichen und zellgebundenen Proteinen, von denen 12 direkt an den Komplementwegen beteiligt sind. Die Proteine machen 5% der Serumglobulinfraktion aus. Die Komplementproteine werden hauptsächlich von Hepatozyten synthetisiert, aber auch Monozyten, Makrophagen und Epithelzellen im Magen-Darm-Trakt und im Urogenitaltrakt produzieren erhebliche Mengen.

C1q ist am klassischen Komplementpfad beteiligt. Der klassische Weg wird durch die Aktivierung des C1- Komplexes (der aus einem Molekül C1q und zwei Molekülen C1r und C1s besteht) ausgelöst, entweder durch die Bindung von C1q an Antikörper der Klassen M und G, komplexiert mit Antigenen, oder durch seine Bindung C1q an die Oberfläche des Erregers.

Das Komplementsystem könnte bei vielen Krankheiten mit einer Immunkomponente eine Rolle spielen, wie z.B. Barraquer-Simons-Syndrom Alzheimer-Krankheit, Asthma, Lupus erythematodes, verschiedene Formen von Arthritis, Autoimmunerkrankungen und Multipler Sklerose, Defekte des Endwegs prädisponieren sowohl für Autoimmunerkrankungen als auch für Infektionen (insbesondere Meningitis). Es gibt viele Tests für die Bestimmung von CIC, darunter der Präzipitationstest mit PEG, radiale Immunodiffusion und zelluläre Tests wie der Test von Ray Cell. Es gibt nicht ein Verfahren zur Bestimmung aller Arten von Immunkomplex; im Handel gibt es einige Tests zur Bestimmung von Fragmenten des Komplexes (Es. C1q und C3d), die eine wichtige diagnostische Bedeutung haben.

TESTPRINZIP

Der CIC-C1q Kit basiert auf der Bindung von C1q-gebundenen Immunkomplexen an auf der Mikrotiterplatte fixiertem C1q.

Im ersten Schritt werden die Proben in die mit C1q beschichteten Wells der Mikrotiterplatte gegeben. In der darauf folgenden Inkubation binden die C1q gebundenen zirkulierenden Immunkomplexe (CICs) an das auf der Mikrotiterplatte fixierte C1q. Mittels eines Waschschrittes werden die ungebundenen Serumproteine entfernt.

Im zweiten Schritt wird anti-humanes IgG konjugiert mit Meerrettichperoxidase (HRP) zugegeben, welches an die auf der Mikrotiterplatte fixierten Immunkomplexe bindet. Der Waschschritt entfernt das ungebundene Konjugat. Im dritten Schritt wird TMB Substrat zugegeben. Dieses reagiert mit dem auf der Mikrotiterplatte gebundenen Konjugat und entwickelt dabei eine Farbreaktion.

Die Menge an CIC IgG Komplexen ist proportional zur Farbintensität bei einer Wellenlänge von 450 nm. Die Konzentration der Immunokomplexe in der Probe wird anhand einer Reihe von Standards berechnet. Das Messergebnis wird ausgedrückt in hitzeaggregiertem humanem Gammaglobulin pro mL (μgEq/mL).