Borrelia burgdorferi IgG ELISA

Enzymimmunoassay zur qualitativen immunenzymatischen Bestimmung von IgG Antikörpern gegen Borrelia burgdorferi in Humanserum oder Plasma (Citrat) und Liquor. Spirochäten sind spiralig gekrümmte, im Vergleich zu ihrem Durchmesser (0,1-3μm) unproportional lange (bis 250 μm) gram-negative Bakterien. Alle pathogenen Spezies gehören zur Familie der Treponemataceae, zu denen folgende Gattungen zählen: Treponema, Borrelia und Leptospira. Die Treponemen sind schlanke, biegsame Bakterien gewöhnlich in charakteristischer Spiralform. Borrelien sind zarte (0,2-0,5μm), relativ lange (bis 250 μm) Spirochäten, mit 3-10 ungleichmäßigen Windungen. Borrelia burgdorferi, der Verursacher der Borreliose-Erkrankung (Lyme-Erkrankung), wird hauptsächlich durch Zecken übertragen, möglicherweise auch durch andere blutsaugende Insekten. Hauptvektor in Europa ist die Schildzecke Ixodes ricinus, in den USA Ixodes damini. Außer B .burgdorferi verursachen auch B. garinii und B. afzelii Lyme-Borreliosen. Die Erkrankung verläuft klassischerweise in drei Stadien. Sie wurde 1975 in der Kleinstadt Lyme im US-Bundesstaat Connecticut beschrieben. Burgdorfer et al. konnten 1983 den Erreger erstmals isolieren. Die Lyme-Borreliose ist eine weit verbreitete Krankheit. Eine echte Prophylaxe existiert nicht. Ca. 10-20 % der Zecken in Europa sind mit Borrelia burgdorferi durchseucht. Die Erkrankungen an Borreliose sind endemisch und treten z.B. in Süddeutschland, entlang von Flussläufen und im Einzugsgebiet großer Städte gehäuft auf. Den natürlichen Lebensraum stellen vor allem bewaldete, feucht-warme Regionen Nordamerikas, Europas, Nordafrikas, Australiens und Japans dar. Saisonale Gipfel akuter Erkrankungen sind die Monate Juni bis September, weitgehend erkrankungsfreie Monate Januar bis März. Bevorzugter Personenkreis sind Waldarbeiter, Förster, Jäger und in der Landwirtschaft tätige Personen. Bedingt durch die Vielzahl möglicher uncharakteristischer Symptome (neurologische, dermatologische, kardiale, rheumatische Manifestationen möglich) ist die Diagnose der Lyme-Borreliose häufig schwer und erfolgt erst relativ spät. Nur die frühzeitige Diagnosestellung jedoch ermöglicht eine effiziente Kontrolle der Erkrankung mittels Antibiotika, in der chronischen Phase sind die Borrelien nahezu unangreifbar. Die qualitative immunenzymatische Bestimmung von spezifischen IgG-Antikörpern gegen B. burgdorferi beruht auf der ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay)-Technik. Hauptbestandteil der B. burgdorferi Flagelle ist Flagellin (41 kDA, p41). Dieses Protein zusammen mit dem spezies-spezifischen Lipoprotein OspC der Außenmembran der Spirochäte induziert die Bildung einer frühen Antikörperformation in der ECM-Phase der Erkrankung (Frühphase, Stadium I). Die spezies-spezifischen Marker p100, p18 und VlsE sind besonders verlässlich im Nachweis der IgG Antwort und sind verantwortlich für die hohe Sensitivität. Kreuzreaktionen mit syphilitischen Seren werden durch die zusätzliche Verwendung von p41i als Antigen vermieden.Der vorliegende Kit enthält die folgenden rekombinanten Epitope: OspC der Stämme B31 (B. sensu stricto), 20047 und T25 (B. garinii), p100 und p18 von PKO (B. afzelii), p41i des Stammes PBi (B. garinii). Mikrotiterstreifen als solide Phase sind beschichtet mit rekombinanten B. burgdorferi Antigenen. Vorhandene spezifische Antikörper in der Probe binden an die immobilisierten Antigene der Mikrotiterplatte. Meerrettich-Peroxidase (HRP) -konjugierte antihuman IgG-Antikörper binden an Antigen- Antikörperkomplexe in positiven Proben. Die entstandenen Immunkomplexe werden durch Blaufärbung nach Inkubation mit Tetramethylbenzidin (TMB) -Substratlösung nachgewiesen. Stoppen der enzymatischen Reaktion mit Schwefelsäure führt zu einem Farbumschlag von blau zu gelb, der einfach nachgewiesen und mit einem ELISA-Reader bei 450 nm gemessen werden kann.

Vertrieben durch Tecan, IBL International GmbH.